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产品描述
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T4 RNA连接酶1是一种ATP依赖的、可催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子之间或分子内5´磷酸末端和3´羟基末端形成磷酸二酯键的酶，该过程中ATP水解为AMP和PPi。本品来源于携带T4 RNA连接酶1基因的E.coli菌株。
来源：重组大肠杆菌。
规格：10 U/µL。
应用
1. RNA 3´-末端标记；
2. ssRNA和ssDNA分子内或分子间的连接；
3. 合成单链寡脱氧核苷酸；
4. RNA环化。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20°C保存。
活性定义
37°C条件下，30min内将1nmol的5´-[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶用量定义为1个活性单位(U)。
质量检测
无内切或外切核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。
操作手册
RNA 环化：
1. 20μL反应体系：
| 试剂 | 加样量 |
| 10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer | 2μL |
| 50% PEG 8000 | 4μL |
| ATP (10 mM) | 0.04-0.1μL |
| RNase inhibitor (40 U/μL) | 0.5μL |
| RNA(1 mM) | 0.2μL |
| T4 RNA Ligase (10 U/μL) | 1μL |
| ddH2O | Up to 20μL |
2. 反应程序
1）孵育：25°C，1～2 h。如果是更长的寡核苷酸，16°C过夜可以增加产量。
2）终止反应：95°C，2 min 或 65°C，15 min。
注意事项
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
上一个
Pfu DNA聚合酶
下一个
T4 DNA连接酶
