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产品描述
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产品描述
SYBR Green I,是一种灵敏度非常高的dsDNA荧光染料,常用于核酸琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶电泳。
采用琼脂糖电泳检测双链DNA时,SYBR GreenⅠ是最灵敏的荧光染料,当其结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额。由于与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此SYBR染料可在低浓度条件下使用。
SYBR GreenⅠ的最低检出限:20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm );此外,SYBR GreenⅠ还可以用于检测寡核苷酸(1~2ng,300nm 紫外透射),比EB灵敏20至100倍。
SYBR GreenⅠ用于电泳检测DNA时,既可预染,也可电泳后再进行染色。
SYBR GreenⅠ用于琼脂糖电泳检测DNA后,可直接将DNA转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。SYBR GreenⅠ与DNA的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
本品是溶于DMSO的SYBR Green I 10000×染液。
规格:100µL。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20°C避光保存。
使用方法
SYBR GreenⅠ使用方法同EB。
点染法:
取本品原液1μL加入TE/TAE/TBE缓冲液1mL, 再加入6×DNA Loading buffer上样缓冲液1 mL混匀为工作液,电泳时取1~2μL工作液和5μL电泳样品混匀后静置5min后直接上样。
胶染法:
配制琼脂糖凝胶100 mL,加热至融化,待温度降至50~60°C后加入本品原液10μL。待胶凝固后即可电泳,电泳结束后即可在紫外照射下观察。
注意事项
1、SYBR GreenⅠ应避光存放,原液保存于-20°C;建议分装冻存,短期可以4°C保存。
2、胶染法灵敏度较高,须将商品化的DNA marker稀释5~10倍后使用。
3、在预染色方法中,电泳时间不要超过2h,否则SYBR GreenⅠ会从DNA上分离出来,会产生弥散状条带。
4、在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。
5、在紫外照射透视下,与双链DNA接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链DNA则颜色为橘黄色而不是绿色。
6、SYBR Green I对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
7、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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