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产品描述
有效活菌数:
生物炭:
有机质:
黄腐酸:
腐植酸:
产品描述
Taq DNA连接Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃~65℃范围内均有活性。
来源:重组大肠杆菌。
规格:40 U/µL。
产品应用
1、用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;
2、通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变;
3、同源重组。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20℃保存。
活性定义
在50 μL 反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量检测
核酸内切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液与0.5 μg pENZuC DNA作用,37℃孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,无肉眼可见的环状切口DNA出现。
核酸外切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液和10000 cpm/μg放射性标记的DNA作用,37℃孵育4 h,溶液中可溶性TCA的释放量小于5.0%。
纯度
SDS-PAGE:≥99%。
操作手册
1、反应体系(50 μL):
试剂 | 加样量 |
DNA | up to 1 µg |
10×Taq DNA Ligase Buffer | 5μL |
Taq DNA Ligase(40 U/µL) | 2μL |
ddH2O | up to 50 μL |
2、反应条件:45℃温育15 min。加入终止染液(50%甘油,50 mM EDTA和溴酚兰)终止反应。
注意事项
1、10×Taq DNA Ligase Buffer中含有辅酶因子NAD+,为了延长NAD+的半衰期,Buffer应于-80℃储存;
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。