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Taq DNA连接酶

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产品编号
所属分类
分子生物酶
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  • 1
    产品描述
    有效活菌数:
    生物炭:
    有机质:
    黄腐酸:
    腐植酸:
    产品描述
    Taq DNA连接Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5'-磷酸和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃~65℃范围内均有活性。
    来源:重组大肠杆菌。
    规格:40 U/µL。
    产品应用
    1、用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;
    2、通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变;
    3、同源重组。
    运输与保存方法
    冰袋运输。产品-20℃保存。
    活性定义
    在50 μL 反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%的1 μg经BstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。
    质量检测
    核酸内切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液与0.5 μg pENZuC DNA作用,37℃孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,无肉眼可见的环状切口DNA出现。
    核酸外切酶活性:在50 μL反应体系中,10 μL酶溶液和10000 cpm/μg放射性标记的DNA作用,37℃孵育4 h,溶液中可溶性TCA的释放量小于5.0%。
    纯度
    SDS-PAGE:≥99%。
    操作手册
    1、反应体系(50 μL):
    试剂 加样量
    DNA up to 1 µg
    10×Taq DNA Ligase Buffer 5μL
    Taq DNA Ligase(40 U/µL) 2μL
    ddH2O up to 50 μL
    2、反应条件:45℃温育15 min。加入终止染液(50%甘油,50 mM EDTA和溴酚兰)终止反应。
    注意事项
    1、10×Taq DNA Ligase Buffer中含有辅酶因子NAD+,为了延长NAD+的半衰期,Buffer应于-80℃储存;
    2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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