您好，欢迎来到潍坊华诺生物科技有限公司官方网站！
销售热线：400-168-2116
浏览量:
1000
产品描述
有效活菌数:
生物炭:
有机质:
黄腐酸:
腐植酸:
产品描述
加帽酶是经大肠杆菌表达、纯化的来源于牛痘病毒的重组蛋白。能特异性将7-甲基鸟苷酸帽子结构(cap 0) 加至RNA的5’端。
末端cap结构有助于真核生物mRNA的稳定，转运，翻译。
加帽酶由D1R，D12L双亚基组成，具有三种酶活性（D1R甲基具有RNA三磷酸酶，鸟苷酸转移酶活性；D12L甲基具有鸟嘌呤甲基转移酶活性）。在体外转录，加帽过程需要加帽酶，GTP，甲基供体(SAM)。
来源：重组大肠杆菌（牛痘病毒）
规格：10 U/ul；
活性单位定义：37℃条件下，1小时嵌合10 pmol的(a32)GTP到80nt的转录产物的酶用量为1U。
储藏温度：-20℃
酶存储缓冲液：20mM Tris-HCl (PH8.0), 0.1mM EDTA, 100mM NaCl, 1mM DTT,0.1%(v/v) Triton X-100,50%(v/v) glycerol
质控检测：无Endonuclease、Nickase、Exonuclease、Rnase污染。
纯度：SDS-PAGE：≥99%
注意事项：
1、 反应体系中不能含有EDTA；
2、 如为了RNA的稳定性，而加入核糖核酸酶抑制剂，按手册中反应体系加入0.5ul核糖核酸酶抑制剂（40U/ul）即可；
3、 在PH7.0-8.0，SAM不稳定，应最后加入SAM；
4、 在反应前，应对RNA进行热处理，保证转录产物的5’末端二级结构打开。
操作手册：
1、 在1.5ml离心管中，加入RNA，无核酸酶污染水；
2、 65℃,5分钟；
3、 冰浴5分钟；
4、 按顺序加入如下溶液：
| 变性RNA | 15ul |
| 10* capping溶液 | 2ul |
| GTP（10mM） | 1ul |
| SAM（2mM） | 1ul |
| 加帽酶 | 1ul |
| 总体积 | 20ul |
5、 37℃,30分钟；
6、 加帽完成。
