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产品描述
有效活菌数:
生物炭:
有机质:
黄腐酸:
腐植酸:
产品描述
T4 RNA连接酶1是一种ATP依赖的、可催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子之间或分子内5´磷酸末端和3´羟基末端形成磷酸二酯键的酶,该过程中ATP水解为AMP和PPi。本品来源于携带T4 RNA连接酶1基因的E.coli菌株。
来源:重组大肠杆菌。
规格:10 U/µL。
应用
1. RNA 3´-末端标记;
2. ssRNA和ssDNA分子内或分子间的连接;
3. 合成单链寡脱氧核苷酸;
4. RNA环化。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20°C保存。
活性定义
37°C条件下,30min内将1nmol的5´-[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶用量定义为1个活性单位(U)。
质量检测
无内切或外切核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。
操作手册
RNA 环化:
1. 20μL反应体系:
试剂 | 加样量 |
10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer | 2μL |
50% PEG 8000 | 4μL |
ATP (10 mM) | 0.04-0.1μL |
RNase inhibitor (40 U/μL) | 0.5μL |
RNA(1 mM) | 0.2μL |
T4 RNA Ligase (10 U/μL) | 1μL |
ddH2O | Up to 20μL |
2. 反应程序
1)孵育:25°C,1~2 h。如果是更长的寡核苷酸,16°C过夜可以增加产量。
2)终止反应:95°C,2 min 或 65°C,15 min。
注意事项
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
上一个
T4 DNA连接酶
下一个
Pfu DNA聚合酶