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T4 RNA连接酶

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产品编号
所属分类
分子生物酶
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  • 手机:0536-8958326
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  • 1
    产品描述
    有效活菌数:
    生物炭:
    有机质:
    黄腐酸:
    腐植酸:
    产品描述
    T4 RNA连接酶1是一种ATP依赖的、可催化ssRNA、ssDNA或单核苷酸分子之间或分子内5´磷酸末端和3´羟基末端形成磷酸二酯键的酶,该过程中ATP水解为AMP和PPi。本品来源于携带T4 RNA连接酶1基因的E.coli菌株。
    来源:重组大肠杆菌。
    规格:10 U/µL。
    应用
    1. RNA 3´-末端标记;
    2. ssRNA和ssDNA分子内或分子间的连接;
    3. 合成单链寡脱氧核苷酸;
    4. RNA环化。
    运输与保存方法
    冰袋运输。产品-20°C保存。
    活性定义
    37°C条件下,30min内将1nmol的5´-[32P] rA16 转化成磷酸盐不溶物所需要的酶用量定义为1个活性单位(U)。
    质量检测
    无内切或外切核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。
    操作手册
    RNA 环化:
    1. 20μL反应体系:
    试剂 加样量
    10× T4 RNA Ligase Reaction Buffer 2μL
    50% PEG 8000 4μL
    ATP (10 mM) 0.04-0.1μL
    RNase inhibitor (40 U/μL) 0.5μL
    RNA(1 mM) 0.2μL
    T4 RNA Ligase (10 U/μL)    1μL
    ddH2O Up to 20μL
    2. 反应程序
    1)孵育:25°C,1~2 h。如果是更长的寡核苷酸,16°C过夜可以增加产量。
    2)终止反应:95°C,2 min 或 65°C,15 min。
    注意事项
    1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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